Notre laboratoire a développé plusieurs modèles ex vivo basés sur le maintien en survie de peau humaine.
Modèles proches des conditions réelles d’utilisation des produits à tester.
La peau conserve une morphologie, une structure et un métabolisme normal.
Plusieurs modes d’applications sont possibles : par voie topique ou solubilisé dans le milieu de survie, application unique ou chronique. Possibilité d’effectuer des injections, des traitements lasers…
Possibilité de reproduire des interactions extérieures : expositions à des UVs ou des polluants, agressions chimiques, plaie, sensibilisation, épilation …
Réalisation d’analyses histologiques
Notre laboratoire dispose d’une batterie de colorations et d’immunomarquages permettant de visualiser différents marqueurs cellulaires et tissulaires. Une quantification des paramètres marqués peut être réalisée par un logiciel d’analyse d’images.
Réalisation d’analyses biologiques
Sur peau entière, épidermes séparés, broyats, extraits ou dans le milieu de culture. Tous les types d’extractions, séparations, chromatographies et dosages peuvent être envisagés.
Réalisation d’études génomiques (en partenariat avec le Laboratoire GENEX)
Criblage à grande échelle et analyse de données génomiques. Identification des effets des produits sur la peau humaine grâce à l’étude de l’expression génique (puce à ADN, puce miRNA, qPCR) corrélés avec l’expression protéique des gènes d’intérêts.
L’objectivation ex vivo permet de comprendre les mécanismes d’action d’un produit ou d’un principe actif sur la peau.
De plus, grâce aux images issues des procédés histologiques, nos études vous fournissent d’excellents supports pour vos revendications marketing.
Le Laboratoire BIO-EC développe également des études à façon spécifiques pour prouver vos revendications.
Le Laboratoire BIO-EC a développé un modèle ex vivo basé sur le maintien en survie de 10 à 12 jours d’explants de peau humaine. Ce modèle permet d’obtenir des réponses pertinentes à vos besoins en objectivation cosmétique et dermatologique.
En effet, ce modèle nous permet :
De travailler dans des conditions très proches de la physiologie réelle de la peau avec notamment, l’ensemble de la population cellulaire et de leurs communications restant actives.
De choisir le phototype, l’âge ainsi que le sexe du donneur.
De mettre en place différents protocoles expérimentaux afin d’affiner au mieux vos objectivations.
D’observer rapidement les effets de votre produit sur la peau en amont d’études in vivo (sur volontaires).
De vous apporter des réponses sur la compréhension du mécanisme d’action de votre produit que vous pourrez illustrer par l’ensemble des photographies fournies dans le rapport final de l’étude.
L’ex vivo apparaît comme étant une technique de choix, tant sur la diversité des paramètres personnalisables pour votre étude que sur la qualité des résultats que vous obtiendrez pour l’objectivation de votre actif ou produit fini.
Le modèle développé par le Laboratoire BIO-EC peut être adapté en fonction des produits à tester. En effet, il est possible de réaliser des études sur peau entière, sur compartiments cutanés isolés ainsi que sur cheveux.
Epaisseur de l’épiderme
Stimulation épidermique et dermique
Marqueurs de l’épiderme
– Division mitotique (Ki67)
– Cytokératines (CK14, CK10, CK1)
– Différenciation des kératinocytes (Involucrine, Loricrine, Caspase 14)
Marqueurs de la jonction dermo-épidermique
– Intégrine B4
– Laminine 5
Marqueurs du derme
– Matrice extracellulaire (GAGs)
– Synthèse de l’acide hyaluronique (HAS1 et HAS2)
– Heparanase 1
– Acide hyaluronique
– Versican
– Elastine
– Fibrilline
– Emiline
– Vimentine
– Collagènes (types I, III, IV, V, VII, VIII et XII)
Autres marqueurs : progerine, NDST1 et NDST2, UGT1A…
Le Laboratoire BIO-EC peut à l’aide de cet appareil mener des études topographiques de la surface d’explants avec une précision évaluée à la dizaine de nanomètre près. Cela permet d’analyser des paramètres variés tels que la profondeur et la largeur des rides et micro ridules ainsi que la rugosité de la peau afin d’évaluer un effet comblant.
– ZO-1
– Occludine-1
– Claudine-1
– Loricrine
– Involucrine
– Caspase 14
Le Laboratoire BIO-EC peut à l’aide de cet appareil évaluer la cinétique de pénétration et la distribution tissulaire de votre produit, les modifications entraînées par votre produit au niveau de la peau sur différents paramètres, le taux d’hydratation dans le stratum corneum et l’épiderme, la répartition des composants du NMF, des lipides cutanés, des caroténoïdes …
Grâce à notre partenariat avec BIC (Bordeaux Imaging Center) il est possible de compléter nos études histologiques avec des observations en MET, comme par exemple l’évaluation de la qualité des bicouches lipidiques.
Le Laboratoire BIO-EC peut à l’aide de cet appareil mener des études topographiques de la surface d’explants avec une précision évaluée à la dizaine de nanomètre près. Cela permet d’analyser des paramètres variés tels que la profondeur et la largeur des rides et micro ridules ainsi que la rugosité de la peau afin d’évaluer un effet filmogène.
Visualisation de la mélanine par Fontana Masson.
Test de screening pour mettre en évidence la mélanine produite par les mélanocytes : test de la DOPA oxydase
Test réalisé sur épiderme séparé.
UVs (Ultra-Violets)
IR (infrarouges)
Lumière visible
SOLARBOX®
Procédé exclusif au Laboratoire BIO-EC qui nous permet d’exposer la peau uniquement à la lumière visible. Il est également possible d’exposer la peau à chaque spectre lumineux indépendamment :
– Domaine visible complet : 420-650 nm
– Bande dans le bleu : 420-480 nm
– Bande dans le vert-jaune : 490-650 nm
– Bande dans le rouge : 575-645 nm
Observation de l’apparition de « Sun Burn Cells (SBC) » ou cellules coup de soleil.
Protection de l’ADN après irradiation UVB
Evaluation du stress oxydant après irradiations UVA
(enzyme mitochondriale)Marqueurs évalués après irradiation aux rayons infrarouges
Marqueurs évalués après irradiation à la lumière visible (lumière bleue)
MDA (malonedialdehyde acid), marqueur de la péroxydation lipidique.
Cytokines
Dans le milieu de culture :
(protéine mitochondrial spécifique des adipocytes bruns).Ce marquage permet de mettre en évidence le passage des adipocytes blancs en adipocytes bruns de taille plus réduite et plus facile d’élimination.
Après application topique du produit.
Cellules de Langerhans : CD1a et langhérine.
Détermination du caractère irritant en conformité avec les BPL (méthode OCDE 439)
Evaluation de la vitesse de réépithélialisation (structure du bourgeon de croissance).
Impact des produits sur les bactéries du microbiome cutané (commensales ou pathogène), influence du produit sur leur adhésion (formation de biofilms, prolifération…).
Procédé exclusif au Laboratoire BIO-EC d’exposition des explants à des polluants atmosphériques :
– Hydrocarbures,
– Métaux lourds,
– Particules de diesel,
– Ozone,
– Fumée de cigarette…
Ce dispositif permet de vaporiser les polluants sous forme de nuage et de les mettre en contact seulement avec la surface de la peau pour se rapprocher au maximum des conditions physiologiques.
(enzyme mitochondriale)
Evaluation après traitement d’explants de cuir chevelu par des levures impliquées dans l’apparition de pellicules.
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